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高純氬色譜分析儀廠家分析色譜法的基本技術(shù)和方法
高純氬色譜分析儀廠家分析色譜法常見的方法有:柱色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。
分配色譜利用固定相與流動(dòng)相之間對(duì)待分離組分溶解度的差異來實(shí)現(xiàn)分離。分配色譜的固定相一般為液相的溶劑,依靠圖布、鍵合、吸附等手段分布于色譜柱或者擔(dān)體表面。分配色譜過程本質(zhì)上是組分分子在固定想和流動(dòng)相之間不斷達(dá)到溶解平衡的過程。
1. 薄層色譜法
薄層色譜法是應(yīng)用非常廣泛的色譜方法,這種色譜方法將固定相圖布在金屬或玻璃薄板上形成薄層,用毛細(xì)管、鋼筆或者其他工具將樣品點(diǎn)染于薄板一端,之后將點(diǎn)樣端浸入流動(dòng)相中,依靠毛細(xì)作用令流動(dòng)相溶劑沿薄板上行展開樣品。薄層色譜法成本低廉操作簡(jiǎn)單,被用于對(duì)樣品的粗測(cè)、對(duì)有機(jī)合成反應(yīng)進(jìn)程的檢測(cè)等用途。
2. 柱色譜法
柱色譜法是最原始的色譜方法,這種方法將固定相注入下端塞有棉花或?yàn)V紙的玻璃管中,將被樣品飽和的固定相粉末攤鋪在玻璃管頂端,以流動(dòng)相洗脫。常見的洗脫方式有兩種,一種是自上而下依靠溶劑本身的重力洗脫,一種是自下而上依靠毛細(xì)作用洗脫。收集分離后的純凈組分也有兩種不同的方法,一種方法是在柱尾直接接受流出的溶液,另一種方法是烘干固定相后用機(jī)械方法分開各個(gè)色帶,以合適的溶劑浸泡固定相提取組分分子。柱色譜法被廣泛應(yīng)用于混合物的分離,包括對(duì)有機(jī)合成產(chǎn)物、天然提取物以及生物大分子的分離。
3. 高效液相色譜
高效液相色譜 (HPLC) 目前應(yīng)用最多的色譜分析方法,高效液相色譜系統(tǒng)由流動(dòng)相儲(chǔ)液體瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對(duì)其流動(dòng)相為液體的特點(diǎn)作出很多調(diào)整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn);進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利切換嚴(yán)密;由于液體流動(dòng)相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體,為了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,長(zhǎng)度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱。HPLC應(yīng)用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域。
4. 氣相色譜
氣相色譜是機(jī)械化程度很高的色譜方法,氣相色譜系統(tǒng)由氣源、色譜柱和柱箱、檢測(cè)器和記錄器等部分組成。氣源負(fù)責(zé)提供色譜分析所需要的載氣,即流動(dòng)相,載氣需要經(jīng)過純化和恒壓的處理。氣相色譜的色譜柱一般直徑很細(xì)長(zhǎng)度很長(zhǎng),根據(jù)結(jié)構(gòu)可以分為填充柱和毛細(xì)管柱兩種,填充柱比較短粗,直徑在5毫米左右,長(zhǎng)度在2-米之間,外殼材質(zhì)一般為不銹鋼,內(nèi)部填充固定相填料;毛細(xì)管柱由玻璃或石英制成,內(nèi)徑不超過0.5毫米,長(zhǎng)度在數(shù)十米到一百米之間,柱內(nèi)或者填充填料或者圖布液相的固定相。柱箱是保護(hù)色譜柱和控制柱溫度的裝置,在氣相色譜中,柱溫常常會(huì)對(duì)分離效果產(chǎn)生很大影響,程序性溫度控制常常是達(dá)到分離效果所必須的,因此柱箱扮演了非常重要的角色。
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